一、实验须知
在微生物的实验中,要求工作谨慎,严防实验室污染,防止事故,有科学态度。
1.严格防止病原微生物散布
第一,在实验室工作,应穿戴工作衣帽,每天实验结束后,要将这些衣帽浸于消毒药水中(如5%石炭酸)或高压消毒后再进行洗涤。
第二,沾有病原微生物的器皿及废弃培养物,应置于指定的地点,消毒后再进行洗涤。检查用过的动物尸体、脏器、血液等病料,应严加消毒,深埋或焚烧。
第三,接种环、接种针等器械,用前用后必须置火焰中烧灼。
第四,含有培养物的试管,应竖列在试管架上,不可平放在桌子上,以防其中液体流出,污染桌面和地面。
第五,实验室中禁止饮食、吸烟及用嘴湿润铅笔和标签等物,也不要以手指等与面部接触。
第六,进行危险病科检验时不要互相交谈或思考其他问题,以免分散注意力而发生意外。
第七,实验室中若发生意外,如工作人员吸入细菌,划破皮肤,细菌或病料污染桌面或地面时,人员应立即自行处理,必要时到医院就医,被病原微生物污染的地点,应敷以浓消毒药(5%石炭酸等)覆盖过 夜。
第八,菌种或毒种不得随意带出实验室,若必需带出时,应严格按规章制度办理。
第九,工作完毕后应先用消毒药水泡手,后用清水冲洗。
2.预防火灾发生
一切易燃品应远离火源。不可将酒精灯倾向另一酒精灯引火,以免发生爆炸。电炉用完后应立即断电。电器发生故障应立即修理。
3.标记和记录
标记和记录所有各种试剂、染料、培养物等,均需标记明确。每日操作及观察结果,均应详细记录。
4.保持清洁卫生与秩序井然
每日工作前,应清洁地面、桌面。实验室中的物资、器具,存放要有一定位置,工作结束后放回原处或指定地点。每日下班前,搞好实验室的清洁卫生和器具整理。
二、玻璃器皿的准备
微生物实验室应用的玻璃器皿种类很多,在选购时注意各种规格和质量,一般应能耐受多次高温灭菌,且以中性者为宜。玻璃器皿用前必须干燥清洁,而且要绝对无菌。
1.新购入玻璃器皿的处理
新购的玻璃器皿,常附有游离碱质,不可直接使用,应先在1%~2%盐酸溶液中浸泡数小时,以中和其碱质,然后再用肥皂水及清水刷洗,以除去遗留的酸质。
2.用过的玻璃器皿的消毒和处理
凡被病原微生物沾污过的玻璃器皿,在洗涤前必须进行严格的消毒。
第一,一般玻璃器皿(如平皿、试管、烧杯、烧瓶等)均可置高压消毒器内在15磅压力下消毒20~30分钟。
第二,吸管、载玻片、盖玻片等可浸泡于5%石炭酸溶液或2%~3%来苏儿溶液中浸泡48小时。浸泡吸管的玻璃筒底部应垫以棉花,以防投入吸管时碰破。
第三,盛有固体培养基(如琼脂)或沾有油脂(如液体石蜡或凡士林等)的玻璃器皿,应于消毒后,随即趁热将内容物倒净,用温水冲洗,再以5%肥皂水煮沸5分钟,然后以清水反复冲洗数次,倒立使之干燥。
3.玻璃器皿的洗涤
第一,将消毒处理过的玻璃器皿浸泡于洗衣粉水中,用试管毛刷反复刷去油脂和污垢,然后用自来水冲洗数次,最后用蒸馏水冲洗。
第二,经清水冲洗后,如发现玻璃器皿上仍有油迹时,可放入1%~5%苏打水或洗衣粉水中煮沸半小时,再用毛刷刷去油脂和污垢,最后用清水或蒸馏水冲洗干净。
第三,吸管的洗涤:①将吸管从消毒剂中取出后,先用细铁丝取出管口的棉塞。若棉塞太紧不易取出时,可将铁丝尖端压扁,插入棉塞和管壁之间,轻轻一转,即可将棉塞拉出。②将吸管浸泡于5%热洗衣粉中,在细铁丝一端,缠以少许棉花,用以刷洗管内的油脂和污垢。③用胶皮管1根,一端接冲棉球,一端接吸管的尖端,在流动的清水或自来水中反复吸冲数次,最后用蒸馏水吸冲数次,倒立于垫有纱布的铁丝筐或其他容器中。
4.玻璃器皿的干燥
洗净的玻璃器皿通常倒立于干燥架上,令其自然干燥,必要时也可放在50℃左右干燥箱中加速干燥。当然温度不宜太高,以免造成破裂。干燥后以干净的纱布或毛巾擦去水迹,再作进一步的处理。
5.玻璃器皿的包装
玻璃器皿在消毒之前,须包装妥当,以免消毒后又被杂菌所污染。各种玻璃器皿的包装方法如下:
第一,一般玻璃器皿(试管、三角瓶)的包装,先做好大小适宜的棉塞或纱布塞,将试管或三角瓶塞好,外面再用纸包扎。烧杯可直接用纸包扎。
第二,吸管先用细铁丝或长针头塞少许棉花于吸管口端,以免使用时将病原微生物吸入口中,同时又可滤过从口中吹出的空气。棉花应大小适度,以不紧不松为宜。最后将吸管一一分别用纸包裹,再用其他纸每10支包成1束。
第三,平皿、培养扁瓶、青霉素瓶等,用无油质的纸将其单个或数个包成1包,置金属盒内或直接进行消毒。
6.载玻片、盖玻片的处理
用过的载玻片和盖玻片,须分别浸泡于2%来苏儿或5%石炭酸溶液内消毒,经48小时后取出,再放入含5%洗衣粉的水中煮沸30分钟,用清水冲洗干净,试干保存,或浸于95%酒精中备用。
7.玻璃器皿用前的消毒
普通玻璃器皿在用前应经干热消毒法(160~180℃,1~2小时)消毒,也可用高压消毒法(15磅压力下,20~30分钟)消毒。
8.玻璃器皿云雾状污垢的处理
凡玻璃器皿上有云雾状而不能用普通方法洗净时,可用清洁液浸泡24小时,再以清水洗去清洁液,然后用洗衣粉水刷洗干净为止。若仍洗不净时应废弃。清洁液可重复应用多次,直至颜色变为蓝绿色或黑色为止。



