1.血凝试验
可采用96孔Ｖ型微量反应板或试管，将待测抗原从1：10开始作倍比稀释，每孔加入生理盐水0.05毫升，最后一孔不加抗原作对照，吸取0.5％的鸡红血球，依次加入每孔0.05毫升；混匀血球，静置室温(18～20℃)中15～30分钟,每隔5分钟观察一次结果，至60分钟时结束，根据血球凝集图形判定结果，凝集孔的血球会均匀分布凝于孔底周围，可见呈颗粒的伞状；不凝集孔的红血球全部集中于微量反应孔的最底点，呈一圆点。最后以能表现凝集病毒的最大稀释度为该待测抗原的血凝滴度，即凝集价。
该法主要用于检测抗原的效价。
2.血凝抑制试验
采用固定抗原稀释法，每批抗原的血凝价通过血凝试验测定或按抗原说明书的血凝价稀释至一定浓度。操作方法：先取4单位抗原依次加入第一排2～11孔，最后孔滴加生理盐水，第一孔加抗原为8单位血凝价，然后用稀释器吸取待检血清对照孔混合后吸0.05毫升于第一孔，混合充分，依次倍比稀释，最后弃0.05毫升，则各孔均为4单位，置室温(18～20℃)下作用20分钟，再用移液器滴加0.5％红血球悬浮于各孔中，充分振荡混合后静置30分钟，观察和血凝试验一样。结果判断，以完全抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的抑制(HI)滴度。通常以以2为底的负对数(-log2)表示。
该方法通常用来检查被检血清和鉴定未知病毒。
三、沉淀试验
可溶性抗原与相应抗体结合，在有电解质存在时可形成肉眼可见的白色沉淀线(或物)，该过程称为沉淀反应。参与沉淀反应的抗原称为沉淀原，抗体为沉淀素。沉淀反应可分为固相和液相，液相沉淀反应中以环状沉淀反应为多见；固相沉淀反应中主要有琼脂扩散试验，对流免疫电泳试验。
以下介绍在禽病中常用的琼脂扩散试验方法。
所谓琼脂扩散反应，即将抗原和抗体在含有电解质的琼脂凝胶中扩散相遇，引起抗原抗体结合形成肉眼可见的沉淀线的现象。琼脂为一种含硫酸基的多糖体，高温时能溶于水，冷后凝固形成凝胶，该凝胶呈多孔结构，孔内充满水分，其孔径大小取决于琼脂浓度，如1％的琼脂凝胶的孔径为85微米，因此允许各种抗原或抗体在琼脂凝胶中自由扩散，当按一定比例加入的抗原和抗体相遇时，就会形成一条明显的沉淀线，而且一对抗原和抗体只能形成一条沉淀线，故该法常用来鉴定抗原、抗体及其效价。如用于传染性法氏囊病、减蛋综合症(EDS-76)、禽脑脊髓炎、鸡白痢的检查。
方法：将清洁平皿(直径约9～10厘米)，置水平台上，倒入加热融化的1％缓冲琼脂15～20毫升，厚度约2.5～3毫米，注意勿倒出气泡，待冷凝后将琼脂平皿放置事先画好的带中央孔的六角形图案的纸上，用金属打孔器按图形位置打孔，再用针头或小镊子将孔内琼脂块挑出，外周孔直径为6毫米，中央孔为4毫米，孔距为3毫米；中间孔滴加标准抗原，周围孔滴加待检血清和阳性对照血清，加完样品后，将平皿置湿盒内，放室温(15～30℃)，观察2～3天。结果判定，标准阳性对照血清与抗原孔之间形成沉淀带，或干扰其毗邻的阳性血清沉淀带使其邻端向内侧偏弯者，判为阳性；与抗原孔之间不出现沉淀带，阳性血清相邻近的沉淀线仍为直线向外偏弯者，判为阴性。
附一：
pH7.4的0.01MPBS：
Na2HPO4·RH22.9克 硫柳汞(防腐剂)0.1克
KH2PO40.3克 蒸溜水 加至1000毫升
NaCl 8.0克
附二：
1％缓冲琼脂：取优质琼脂1克加pH7.4的PBS100毫升，水浴煮沸30分钟，中间振荡数次，促其融化均匀。保存于4℃冰箱。
四、红细胞吸附和红细胞吸附抑制试验
又称红血球吸附和红血球吸附抑制试验。某些病毒如鸡痘病毒、正、副粘病毒等，在培养的细胞内增殖后，可使培养的细胞吸附某些动物的红细胞，而且只有感染细胞的表面吸附红细胞，不感染的细胞不吸附红细胞，因此可以作为这种病毒增殖的衡量指数。红细胞吸附现象也可被特异抗血清所抑制，故可作病毒的鉴定方法，尤其对一些不产生细胞病理变化的病毒，不失为一种快速有效的鉴定方法。
操作方法：细胞经培养长成单层后，常规接种病毒，经一定时间培养，弃培养液，加0.4％～0.5％已洗涤的红细胞悬液，置室温(18～20℃)作用一刻钟(某些病毒置4℃或37℃)；加少量生理盐水，轻轻洗涤，去未吸附的红细胞，放在低倍显微镜下观察。如红细胞粘附于单层细胞中的感染细胞表面，病毒大量增殖时，可见整个单层细胞粘满红细胞，则均判为阳性。进行抑制试验时，用Ｈank’s液将经病毒接种培养后的培养液洗涤2次，然后加入1：10稀释的抗血清，室温或37℃30分钟后，弃血清，加入红细胞悬液，如上进行红细胞吸附试验，镜检红细胞吸附强度，与对照相比，完全抑制为阳性。
附：Hank’s(汉克斯氏)液：
原液甲一：
NaCl 160克 MgSO4·7H2O 2克
KCl 8克 MgCl2·6H2O 2克
按顺序加入到800毫升双蒸溜水中，一物溶解后再加另一物。
原液甲二：
CaCl2 2.8克溶于100毫升双蒸溜水中。
以上两液混合，加双蒸溜水达1000毫升,加2毫升氯仿防腐,保存于5℃。
原液乙一：
Na2HPO4·12H2O 3.04克 葡萄糖 20克
KH2PO4 1.20克
按顺序加入到800毫升双蒸溜水中。
原液乙二：0.4％酚红液100毫升(0.4％酚红液将是0.4克酚红置乳钵中,边研磨边涂加入0.1N的NaOH11.8毫升;酚红应完全溶解，置于100毫升量杯中，最后加双蒸水至100毫升)。
将酚红液与葡萄糖等混合液混合，加双蒸溜水至1000毫升，加入2毫升氯仿防腐，保存于5℃。
按下列方法配成汉克斯氏液：原液甲1份，原液乙1份，双蒸溜水18份,此液在5℃下可存1个月。
使用前以1.4％NaHCO3(9磅10分钟灭菌过)，无菌操作，校正pH到7.4(依需要定)，大约每20毫升的Hank’s液加0.5毫升的NaHCO3可达pH7.4，此时颜色为黄红色。
五、补体结合试验
