马立克氏病（Marek's Disease，简称MD），是由疱疹病毒科α亚群马立克氏病病毒引起的，以危害淋巴系统和神经系统，引起外周神经、性腺、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤的单个或多个组织器官发生肿瘤为特征的禽类传染病。我国将其列为二类动物疫病。
为预防、控制和消灭马立克氏病，依据《中华人民共和国动物防疫法》和其它相关法律法规，制定本规范。
1 适用范围
本规范规定了马立克氏病的诊断技术、疫情报告、疫情处理和预防措施。
本规范适用于中华人民共和国境内的一切从事禽类饲养、经营和禽类产品生产、经营，以及从事动物防疫活动的单位和个人。
2 诊断
根据流行病学特点、临床症状、病理变化等可做出初步诊断，确诊须进行病原分离鉴定或血清学诊断。
2.1 流行病学
鸡是主要的自然宿主。鹌鹑、火鸡、雉鸡、乌鸡等也可发生自然感染。2周龄以内的雏鸡最易感。6周龄以上的鸡可出现临床症状，12～24周龄最为严重。
病鸡和带毒鸡是最主要的传染源。呼吸道是主要的感染途径，羽毛囊上皮细胞中成熟型病毒可随着羽毛和脱落皮屑散毒。病毒对外界抵抗力很强，在室温下传染性可保持4～8个月。
2.2 临床症状
本规范规定本病的潜伏期为4个月。
根据临床症状分为4个型，即神经型、内脏型、眼型和皮肤型。
神经型：最早症状为运动障碍。常见腿和翅膀完全或不完全麻痹，表现为“劈叉”式、翅膀下垂；嗉囊因麻痹而扩大。
内脏型：常表现极度沉郁，有时不表现任何症状而突然死亡。有的病鸡表现厌食、消瘦和昏迷，最后衰竭而死。
眼 型：视力减退或消失。虹膜失去正常色素，呈同心环状或斑点状。瞳孔边缘不整，严重阶段瞳孔只剩下一个针尖大小的孔。
皮肤型：全身皮肤毛囊肿大,以大腿外侧、翅膀、腹部尤为明显。
本病的病程一般为数周至数月。因感染的毒株、易感鸡品种（系）和日龄不同，死亡率表现为2%～70%。
2.3 病理剖检变化
神经型：常在翅神经丛、坐骨神经丛、坐骨神经、腰荐神经和颈部迷走神经等处发生病变，病变神经可比正常神经粗2～3倍，横纹消失，呈灰白色或淡黄色。有时可见神经淋巴瘤。
内脏型：在肝、脾、胰、睾丸、卵巢、肾、肺、腺胃和心脏等脏器出现广泛的结节性或弥漫性肿瘤。
眼 型：虹膜失去正常色素，呈同心环状或斑点状。瞳孔边缘不整，严重阶段瞳孔只剩下一个针尖大小的孔。
皮肤型：常见毛囊肿大，大小不等，融合在一起，形成淡白色结节，在拔除羽毛后尸体尤为明显。
2.4 实验室诊断
2.4.1 病原分离鉴定(见附件1)
2.4.2 病理组织学诊断
主要以淋巴母细胞、大、中、小淋巴细胞及巨嗜细胞的增生浸润为主，同时可见小淋巴细胞和浆细胞的浸润和雪旺氏细胞增生。
2.4.3 免疫学诊断
免疫琼脂扩散试验（见GB/T 18643）。
2.5 鉴别诊断
内脏型马立克氏病的病理变化易与禽白血病（LL）和网状内皮增生症（RE）相混淆，一般需要通过流行病学和病理组织学进行鉴别诊断。
2.5.1 与禽白血病（LL）的鉴别诊断
2.5.1.1 流行病学比较
禽白血病（LL）一般发生于16周龄以上的鸡，并多发生于24～40周龄之间；且发病率较低，一般不超过5％。MD的死亡高峰一般发生在10～20周龄之间，发病率较高。
2.5.1.2 病理组织学变化
禽白血病（LL）肿瘤病理组织学变化主要表现为大小一致的淋巴母细胞增生浸润。MD肿瘤细胞主要表现为大小不一的淋巴细胞。
2.5.2 与网状内皮增生症（RE）的鉴别诊断
网状内皮增生症（RE）在不同鸡群感染率差异较大，一般发病率较低。其病理组织学特点是：肿瘤细胞多以未分化的大型细胞为主，肿瘤细胞细胞质较多、核淡染。有些病例也表现为大小不一的淋巴细胞。
现场常见MDV和REV共感染形成的混合型肿瘤，需做病原分离鉴定。
2.6 结果判定
2.6.1 临床诊断为疑似马立克氏病
符合流行病学2.1、临床症状2.2和剖检病变2.3的。
2.6.2 确诊
符合结果判定2.6.1，且符合实验室诊断2.4.1；或符合2.4.2和2.4.3的。
3 疫情报告
3.1 任何单位和个人发现患有本病或疑似本病的禽类，应立即向当地动物防疫监督机构报告。
3.2 当地动物防疫监督机构接到疫情报告后，按国家动物疫情报告管理的有关规定执行。
4 疫情处理
根据流行病学特点、临床症状、剖检病变，结合病原分离鉴定、组织病理学和免疫学检测做出的诊断结果可作为疫情处理的依据。
4.1 发现疑似马立克病疫情时，养殖户应立即将发病禽群隔离，并限制其移动。当地动物防疫监督机构要及时派员到现场进行调查核实，包括流行病学调查、临床症状检查、病理解剖、采集病料、实验室诊断等，根据诊断结果采取相应措施。
4.2 当疫情呈散发时,须对病禽及同群禽进行扑杀和无害化处理（按照GB 16548进行）。同时，对禽舍和周围环境进行消毒，对受威胁禽群进行观察。
4.3 当疫情呈暴发流行时按照以下要求处理
4.3.1 划定疫点、疫区、受威胁区
由所在地县级以上（含县级）兽医主管部门划定疫点、疫区、受威胁区。
疫点：指患病禽类所在的地点。一般是指患病禽类所在的禽场（户）或其它有关屠宰、经营单位；如为农村散养，应将自然村划为疫点。
疫区：指疫点外延3公里范围内区域。疫区划分时，应注意考虑当地的饲养环境和天然屏障（如河流、山脉等）。
受威胁区：指疫区外延5公里范围内的区域。
4.3.2 处置要求
在动物防疫监督机构的监督指导下，扑杀发病禽及同群禽，并对被扑杀禽和病死禽只进行无害化处理；对环境和设施进行消毒；对粪便及其它可能被污染的物品，按照GB 16548进行无害化处理；禁止疫区内易感动物移动、交易。
禽类尸体需要运送时，应使用防漏容器，并在动物防疫监督机构的监督下实施。
4.3.3 进行疫源分析和流行病学调查
4.3.4 处理记录
对处理疫情的全过程必须做好完整的详细记录，以备检查。
5 预防与控制
实行“以免疫为主”的综合性防治措施。
5.1 加强饲养管理，提高环境控制水平
饲养、生产、经营等场所必须符合《动物防疫条件审核管理办法》（农业部15号令）的要求，并须取得动物防疫合格证。
饲养场实行全进全出饲养方式，控制人员出入，严格执行清洁和消毒程序。
5.2 加强消毒管理，做好基础防疫工作
各饲养场、屠宰厂（场）、动物防疫监督检查站等要建立严格的卫生（消毒）管理制度。
5.3 免疫
应于雏鸡出壳24小时内进行免疫。所用疫苗必须是经国务院兽医主管部门批准使用的疫苗。
5.4 监测
养禽场应做好死亡鸡肿瘤发生情况的记录，并接受动物防疫监督机构监督。
5.5 引种检疫
国内异地引入种禽时，应经引入地动物防疫监督机构审核批准，并取得原产地动物防疫监督机构的免疫接种证明和检疫合格证明。
附件1
马立克氏病病原分离
1 用细胞作为MDV分离和诊断的材料
1.1 细胞来源
应来自病鸡全血(抗凝血)的白细胞层或刚死亡鸡脾脏细胞。
1.2 方法
1.2.1 将白细胞或脾脏细胞制成含有106～107个活细胞/ml的细胞悬液。
1.2.2 将0.5ml样品，分别接种2瓶（大小25 ㎝2）用SPF鸡胚制备的成纤维细胞。另取1瓶做空白对照。
1.2.3 将接种病料的和未接种病料的对照细胞培养瓶均置于含有5％CO2 的37.5°C的二氧化碳培养箱内。
1.2.4 每隔3天，换一次培养液。
1.2.5 观察有无细胞病变（CPE），即蚀斑，一般可在3～4天内出现。若没有，可按上述方法盲传1～2代。
2 用羽髓作为MDV分离和诊断的材料
这种方法所分离的病毒为非细胞性的，但不常用。
2.1 取长约5mm的羽髓或含有皮肤组织的羽髓，放入SPGA－EDTA缓冲液〔0.2180M蔗糖（7.462g）；0.0038M磷酸二氢钾（0.052g）；0.0072M磷酸二氢钠（0.125g）；0.0049ML－谷氨酰胺（0.083g）、1.0％血清白蛋白（1 g）和0.2％乙二胺四乙酸钠（0.2g），蒸馏水100ml，过滤除菌，调节pH值到6.3〕中。
2.2 病毒的分离与滴定方法
上述悬浮液经超声波处理，通过0.45μm微孔滤膜过滤后，接种于培养24小时的鸡肾细胞上，吸附40分钟后加入培养液，并按上述方法培养7 天。
3 上述方法可以用于1型和2型MDV的分离
所分离的病毒如果是免疫禽群，也可以分离到疫苗毒。
有经验的工作人员可根据蚀斑出现的时间、发展速度和形态，即可对各型病毒引起的蚀斑作出准确鉴别。HVT蚀斑出现较早，而且比1型的要大，而2型的蚀斑出现晚，比1型的小。
附件2
消 毒
1 消毒前的准备
1.1 消毒前必须清除有机物、污物、粪便、饲料、垫料等；
1.2 必须选用对马立克氏病病毒有效的消毒药品，如烧碱、醛类、氧化剂类、酚制剂类、氯制剂类、双季胺盐类等。
1.3 备有喷雾器、火焰喷射枪、消毒车辆、消毒防护用具（如口罩、手套、防护靴等）、消毒容器等。
1.4 注意消毒剂不可混用.
2 消毒范围
禽舍地面及内外墙壁，舍外环境；饲养、饮水等用具，运输等设施设备以及其它一切可能被污染的场所和设施设备。
3 消毒方法
3.1 金属设施设备的消毒，可采取火焰、熏蒸等方法消毒；
3.2 圈舍、场地、车辆等，可采用消毒液清洗、喷洒等方法消毒；
3.3 养禽场的饲料、垫料等，可采取深埋发酵处理或焚烧处理等方法消毒；
3.4 粪便等可采取堆积密封发酵或焚烧处理等方法消毒；
3.5 饲养、管理等人员可采取淋浴等方法消毒；
3.6 衣帽鞋等可能被污染的物品，可采取浸泡、高压灭菌等方法消毒；
3.7 疫区范围内办公、饲养人员的宿舍、公共食堂等场所，可采用喷洒的方法消毒；
3.8 屠宰加工、贮藏等场所以及区域内池塘等水域的消毒可采取相应的方法进行，并避免造成有害物质的污染。
