新城疫病毒做载体制疫苗 可预防H5N2禽流感

　　禽流感是由甲型流感病毒的一种亚型（也称禽流感病毒）引起的一种急性传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。该病毒也能感染人类，被国际兽医局定为甲类传染病。甲型流感病毒根据位于其套膜上的血凝素及神经氨酸酶的抗原性分为若干亚型，血凝素（H）有16个亚型；神经氨酸酶（N）有9个亚型，各地分离的毒株以血凝素和神经氨酸酶的序号命名。所有的这些亚型都可以感染鸟，在禽类中高致病性的属于H5、H7亚型。

 

　　近日，npj Vaccines发表了文章称，文章作者成功研发了新城疫病毒载体H5疫苗（ndv-h5疫苗)，并且评估了该疫苗的应用效果。结果表明，在用ndv-h5活疫苗和灭活疫苗初次免疫和加强免疫后，均诱导产生了血凝抑制抗体滴度；并且这两种ndv-h5疫苗都可以完全保护鸡免受高致病性禽流感病毒株H5N2 A/turkey/Minnesota/9845-4/2015的致死性攻击。该疫苗可以大规模应用于家禽业。

 

　　部分结果概览

 

　　基于一株H5N2禽流感病毒株A/chicken/Iowa/04-20/2015 的H5亚型流感病毒血凝素（H5HA）的密码子优化胞外结构域克隆到新城疫病毒载体，并通过测序证实。携带新城疫LaSota疫苗株的全基因组和与新城疫F蛋白包膜胞质尾部分融合的H5HA的全长cDNA克隆共转染A549细胞。重组ndv-h5病毒株被成功拯救并在SPF鸡胚中扩增。作者通过免疫荧光染色和流式细胞仪技术对重组ndv-h5病毒中HA的表达进行了检测。在加入抗ha单克隆抗体，感染了ndv-h5病毒的VERA细胞中，检测到特异性绿色荧光，但是在野生型新城疫LaSota株中并未检测到任何绿色荧光。但是在感染了重组ndv-h5毒株和野生型新城疫LaSota株的VERA细胞中都能检测到新城疫抗原。重组ndv-h5中HA的表达进一步通过流式细胞仪进行检测。重组ndv-h5病毒成功表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白，可作为进一步实验的候选疫苗。

 

　　对ndv-h5活疫苗和灭活疫苗免疫鸡组和对照组（未接种ndv-h5活疫苗或灭活疫苗），用高致病性禽流感病毒H5N2攻毒试验后，对肺脏、脾脏和法氏囊通过病变组织染色和免疫组化分析发现，仅在对照组中出现高致病性禽流感H5N2病毒特异性组织病理学和免疫组化阳性结果。结果说明该研究构建的重组ndv-h5活疫苗和灭活疫苗均能保护鸡群避免病理损伤。