禽流感灭活疫苗（H9）不同免疫途径免疫效果的比较

　　作者：国林　赵全兴　李梅　马建平　杨欣欣　汪冉　刁有祥

　　前言：禽流感(Avian Influenza，AI)病。禽类感染后表现为呼吸道症状、食欲减少、急性高度致死性。自1878年AI首次在意大利流行以来，蔓延迅速，世界大部分国家和地区均相继有AI发生的记录和报道，每一次严重暴发都给养禽业造成巨大的经济损失。禽流感没有特效的药物治疗，因此疫苗免疫是控制本病最有效的方法。本文探讨禽流感灭活疫苗不同接种部位的防疫效果，筛选最佳的防疫途径，以期指导生产实践。

　　一　材料与方法

　　1　试验动物

　　1日龄健康海兰褐蛋鸡，购于泰安东岳种禽有限公司。

　　2　试验材料

　　96孔V型微量反应板、移液器、生理盐水、1％鸡红细胞悬液。禽流感H9亚型血凝抑制试验抗原由中国科学院提供；禽流感灭活疫苗(H9亚型)购于乾元浩生物股份有限公司。

　　3　试验动物的赴理

　　600只健康海兰褐蛋鸡根据不同免疫途径随机分为A、B、C、D、E五组，每组120只。A组为空白对照、B组为颈部皮下注射、C组为胸部肌肉注射、D组为翅根部肌肉注射、E组为腿部肌肉注射。在45曰龄、95日龄分别注射禽流感灭活疫苗(H9)0.5mL。试验在相同的环境下，采用同种饲料进行饲喂，同一免疫程序(表1)进行免疫预防，每隔3天随机选取15只鸡翅静脉采血，分离血清，根据HI法捡测鸡的抗体水平，根据平均值绘制抗体消减曲线。

　　4　抗体水平检测

　　栗用血凝(HA)与血凝抑制试验(HI)(《高致病性禽流感诊断技术》中华人民共和国国家标准GB/T 18936-2003)。

　　二　结果

　　不同防疫部位下禽流感(H9)抗体滴度见图1，

　　45日龄免疫禽流感H9亚型疫苗后，D组(翅根部肌肉注射)抗体上升速度最快，57目龄达到阶段性最高值，为8.2 log2，B组(颈部皮下注射)上升速度最慢，这主要因为肌肉注射，吸收速度比皮下注射快，产生抗体也较快，而皮下注射疫苗吸收缓慢而均匀，产生抗体比较慢；5772日龄，B、C、D、E组抗体水平基本一致，抗体曲线变化相吻合且抗体水平一直维持在61og2以上；72目龄以后，E组(腿部肌肉注射)抗体滴度平均值最高，且E组抗体滴度较其他组高0.5～2.0个滴度，B、C、D组抗体水平比较稳定，均匀度也较好。

　　三　讨论

　　通过45日龄、95目龄两次禽流感灭活疫苗的免疫，由H9亚型抗体变化曲线可清楚看出腿肌注射效果最好，抗体滴度比颈部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三种注射方式高；而颈部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三种注射方式免疫效果基本一致。

　　综合分析整个试验，腿部肌肉注射：禽流感灭活疫苗(H9N2亚型)；颈部皮下注射：禽流感二价灭活疫苗(H5+H9)、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(HBNl，Re-4+Re-5株)、禽流感灭活疫苗(H9N2亚型)；胸肌注射：禽流感灭活疫苗(H9N2亚型)、传染性法氏囊炎卵黄抗体；翅根部肌肉注射：重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5Nl，Re-4十Re-5株)、禽流感灭活疫苗(H9N2亚型)。由此可看出：除腿部肌肉外，其它防疫部位均注射两种以上疫苗，而且每个部位吸收疫苗是有限的，防疫频繁、疫苗剂量过大均会影响疫苗的吸收效果。这就提醒我们在实际操作中，要熟练掌握各种防疫手法，不能因为省时省力而每次都注射在同一部位，不利于疫苗的吸收，从而影响免疫效果。

　　整个蛋鸡的饲养过程中，疫苗免疫需作统筹的安排，尽量不要短期内同一部位重复注射；同～部位油苗的注射应低于3次。