黑龙江牡丹江地区鸡球虫病流行病学调查

　　一　材料与方法
 
　　1 调查材料
 
　　调查对象为随机选取牡丹江的宁安、穆棱、海林、林口4个县区23个养鸡场和29个养鸡农户。分点采集每个养鸡场和养鸡农户的鸡的新鲜粪便20份，分装到干净的塑封袋内，登记编号，带回学校实训室检查；在此期间，对来我校兽医院就诊的疑似球虫病的病鸡，收集其肠内容物，记录养鸡地区名称和饲养方式等信息。共计52个养鸡场(户)，粪便和肠内容物样品总计1107份。
   
　　2 卵囊的分离与收集
   
　　将采集的病鸡肠内容物或新鲜粪用饱和食盐水漂浮法收集球虫卵囊。先将采集的样品加水捣碎，用2n0目筛进行过滤和离心沉淀，向沉淀物中加饱和食盐水进行漂浮，取漂浮液用显微镜观察球虫卵囊的有无，离心洗去饱和盐水，收集球虫卵囊，在装有25g／L重铬酸钾溶液的平皿中保存，放置到28℃恒温箱中培养2—3天；得到孢子化卵囊，备用。
   
　　3 卵囊扩增   
   
　　保存于4。C上述孢子化卵囊按4×10。个／只鸡的剂量接种于10目龄严格饲养于无球虫环境肉鸡，肉鸡饲养于无卵囊污染的条件，所用饲料均为特别制作，无任何添加药物，感染第5天开始收集粪便，直至第13天收集结束，检查卵囊的增殖情况和各种类的潜隐期，通过观察鸡球虫的特征、裂殖体和寄生部位、病鸡的临床症状和病变部位等来鉴定感染球虫的种类。
   
　　4 卵囊的鉴定
   
　　将扩增得到的卵囊在高倍镜下进行观察，包括卵囊的形态和大小、卵囊壁的厚度和颜色、内外残体和斯氏体的有无、孢子囊的形状等。在29℃恒温培养箱中，每隔2小时观察一次卵囊孢子化。每个种类随机抽样120个鸡球虫，在显微镜下观察卵囊并测量，求出最大值、最小值和平均值，根据卵囊上述生物学特征和参考资料描述进行种类鉴别。
   
　　二  结果
   
　　牡丹江部分地区艾美耳球虫感染情况(感染率和种类)(见表1和表2)。

   
　　三 讨论
   
　　1 牡丹江部分地区鸡球虫病的病原
   
　　本次在牡丹江地区的海林、宁安、穆棱和林口4个县区养鸡场(户)中主要查出了艾美耳球虫共计6种，柔嫩艾美耳球虫(49．33％)、堆型艾美耳球虫(47．76％)、巨型艾美耳球虫(45．40％)为主要感染虫种，鸡群总感染率为80．58％，表明在牡丹江部分地区鸡球虫病的主要病原是这3种艾美耳球虫。
   
　　2 诊断鸡球虫种类的生物学特征
   
　　有肉眼可见的病变、病变的位置和卵囊大小，这些生物学特征可用于进行鸡球虫种类的判断。卵囊大小可以用来单纯鉴定巨型艾美耳球虫，该球虫的卵囊比其它种类球虫大。通过调查发现的6种艾美耳球虫的特征基本与文献资料报道的一致，在形态上个别虫种的卵囊稍有差异。
   
　　3 鸡球虫病感染的季节性
   
　　卵囊的孢子化与外界环境的温度、湿度及空气流通关系密切。由于冬季鸡舍温度在20℃以下且较为干燥，所以卵囊发育受到限制，从而鸡球虫病的发生随之减少。而春秋季节，温度和湿度较大，为球虫病的高发季节。在夏季，有时气温高于30％：，卵囊发育同样受到限制，球虫病的发病率降低。本次调查时间为2010年9月～2011年3月，从感染结果来看，宁安、穆棱、海林、林口4个县区的感染率均大于75％，可见感染率较高。这个实验结果说明，本地区鸡球虫病的发生受季节影响不明显。由于牡丹江地区处于我国北方，入冬时间较早，气温较低，但是对于养殖户和集约化养鸡场大多饲养密度较大，且注意冬季的保暖，因此，球虫感染的季节性变化不显著。