鸡肾炎病毒的分离培养

　　1、细胞培养 ANV不能在鸭胚成纤维细胞或其他已建立的哺乳类细胞系(如Hela、Vero、PK-15和MDCK)中生长。

　　一般是用鸡肾细胞(CKC)进行ANV的培养与增殖，能够产生细胞病变(CPE)；病料接种已长成单层的细胞，感染后24小时病毒滴度最高，在接种后72小时细胞出现圆细胞型CPE，但不产生包涵体和血凝素。

　　2、鸡胚接种 选择6日龄的SPF鸡胚或无ANV抗体的胚进行卵黄囊接种，感染后3～14天内死亡，鸡胚全身性出血、水肿、绒毛尿囊膜肥厚，生长停滞；接种9天以后才死亡的鸡胚，其胎儿严重发育不良，比正常胎儿要明显小得多；如果经绒毛尿囊膜突进接种，则胎儿很少发生死亡。病毒分离物能通过50纳米微孔滤膜。

　　3、易感鸡接种试验 对1日龄SPF雏鸡用处理过的病料或用胚胎制备的50％组织悬液经腹腔内接种不表现临床症状，但生长停滞；而经口腔接种，可在感染后3—7天肾脏出现肉眼可见病变。用特异性的抗ANV荧光抗体染色受感染肾脏组织切片或细胞培养物检查病毒抗原，可以作为疾病早期诊断的一种手段。