新支活疫苗检验方法介绍

　　活疫苗的检测项目主要涉及安全性和保护力两个方面。例如通过接种培养基来检测疫苗是否存在细菌或支原体污染;通过ELISA或免疫荧光(IFA)检测是否存在其他病毒的污染;通过接种鸡胚活细胞来检测疫苗的有效抗原含量等。

　　检测项目通常还包含疫苗的物理性状，例如形态、颜色、含水量，以及真空度等。每种测试方法都旨在验证疫苗的预期保护力，同时确保不会对接种鸡只造成伤害。

　　新支活疫苗(鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗)的标准检验方法主要包括以下方面：

　　性状

　　新支二联冻干活疫苗应为淡黄色或淡红色海绵状疏松团块，易于瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。如果在使用疫苗之前发现疫苗团块发生坍缩，表示疫苗有失真空或进入大量水汽的风险，对于冷冻保存的疫苗，在经历运输-再冷冻后水分会产生冰晶损伤疫苗病毒，因此对于团块坍缩的冻干活疫苗不建议使用。

　　无菌检验

　　将新支活疫苗接种于细菌培养基，检测疫苗中是否存在细菌。根据现行《中国兽药典》规定，新支活疫苗中不得存在禽沙门氏菌，但是每羽份疫苗有一个非病原菌是可以接受的。

　　支原体检验

　　将新支活疫苗接种支原体培养基，检测疫苗中是否存在支原体。新支活疫苗中不得存在支原体。

　　外源病毒检验

　　1.鸡胚检查

　　将疫苗与新城疫和传支的特异性血清混合后接种鸡胚，不应引起特异性死亡及鸡胚病变，至少有8/10个鸡胚存活，且鸡胚液没有血凝性。这个检验的目的是确认疫苗中含有的疫苗毒为新城疫病毒和传支病毒，而且传支病毒的血清型与标签所示的血清型一致。如果疫苗中加入了其它血清型的传支，则可能无法通过该检验。

　　2.细胞检查

　　将经过新支血清中和后的疫苗接种于鸡胚成纤维细胞，不应出现细胞病变。这些鸡胚成纤维细胞不应出现红细胞吸附现象。这项检测的目的同样是检验疫苗中可能存在的能够在细胞中复制的外源病毒。

　　3.禽淋巴白血病病毒检验

　　通过ELISA的方法检查疫苗中是否存在禽淋巴白血病病毒。

　　4.禽网状内皮组织增生症病毒检验

　　通过IFA的方法检查疫苗中是否存在禽网状内皮组织增生症病毒。

　　安全检验

　　将新支疫苗接种于SPF鸡，每只10羽份，观察21天，接种鸡只不应发生异常反应。通常新支活疫苗接种鸡胚会导致鸡胚发生病变，但是使用10羽份接种相应日龄的SPF鸡则不应出现异常反应。

　　效力检验

　　通过系列稀释接种鸡胚的方法，分别检测并计算疫苗中新城疫病毒和传支病毒的含量，单位为鸡胚半数感染量(EID50)。由于新支活疫苗中新城疫病毒的EID 50数远高于传支，大约为1000倍，因此在检测传支病毒含量时需要先将新城疫病毒中和掉，而检测新城疫病毒含量时可以不中和掉传支病毒。新支两种疫苗毒的抗原含量均应达到产品质量标准。

　　剩余水分和真空度测定

　　冻干活疫苗的剩余水分含量应在4%以下，并通过真空度的辉光检验。

　　新支活疫苗的标准检验方法是一个多维度、严要求的体系，涵盖了从物理性状到免疫效力的方方面面。整套检验需要投入大量的人工和耗材成本，严格执行每一项，每一步检验是保障疫苗安全、有效、质量稳定的基石，是必不可少的。疫苗检验需要一定的时间，这使得在终端用户在拿到疫苗时，距离生产日期已经过去了一段日子，但是为了保障产品安全有效，这段等待是必不可少的。